November 2018
Beginner to intermediate
260 pages
5h 10m
Japanese
book
バイオビルダー ―合成生物学をはじめよう
by Natalie Kuldell, Rachel Bernstein, Karen Ingram, Kathryn M. Hart, 津田 和俊, 片野 晃輔, 西原 由実, 濱田 格雄
Content preview from バイオビルダー ―合成生物学をはじめよう
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また、
crtYB
’と呼んでいる
crtYB
遺伝子の冗長性のある合成コピーを含むプラスミド
も提供します。この遺伝子は、元の
crtYB
遺伝子と同じタンパク質産物を産生しますが、
コドンが入れ替えられた
DNA
配列でコードされています。この遺伝子の再コーディン
グは、遺伝コードの縮重のおかげで起こり得ます。
PCR
実験の場合と同様に、この冗
長性のあるコピーを自分で設計することもできるでしょう。この
crtYB
の冗長性のある
コピーを赤色、オレンジ色、黄色、または白色の酵母に形質転換します。酵母の形質
転換プロトコルは大腸菌を形質転換するためのプロトコルとはわずかに異なりますが、
基本は同じです。形質転換反応をプレートにまいて菌株を
2
日間培養させた後、異な
る色のコロニーの数を数え、この冗長性を導入したことでシステムがより確実に機能
したかどうかを評価します。
この実験のための酵母株は、その染色体
DNA
に組み込まれたβ
-
カロテン産生遺伝
子回路を含みます。酵母は、「高層培地」
（スタブ）
、または傾斜した培地上に少量の酵
母を含む試験管である「斜面培地」
（スラント）
の状態で届きます。
1.
滅菌した爪楊枝または接種ループ
（白金耳）
を用いて、プレートに酵母をストリー
クする［寒天培地の表面上にジグザグに縞を描く］。爪楊枝またはループでスタブ
から細胞を少量集めて、
YPD
寒天培地
［
76
］
に細胞を移す。
2.
プレートの培地側を上にして
30
℃のインキュベーター内に
36
〜
48
時間置く。プレー
トは室温で培養することもできるが、その場合、細胞はよりゆっくりと成長する。
実験演習のプロトコル
これは実験演習のプロトコルの短縮版で、形質転換についてのみ書かれています。コ
ロニー
PCR
および冗長性のある合成遺伝子の設計に関する説明は、 ...
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I'm always learning. So when I got on to O'Reilly, I was like a kid in a candy store. There are playlists. There are answers. There's on-demand training. It's worth its weight in gold, in terms of what it allows me to do.