November 2018
Beginner to intermediate
260 pages
5h 10m
Japanese
book
バイオビルダー ―合成生物学をはじめよう
by Natalie Kuldell, Rachel Bernstein, Karen Ingram, Kathryn M. Hart, 津田 和俊, 片野 晃輔, 西原 由実, 濱田 格雄
Content preview from バイオビルダー ―合成生物学をはじめよう
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145
1.
植菌する各株に対して繰り返す。
2.
インキュベーターの中にある回転型振とう器
（ローテーター）
にカルチャーチューブ
を入れて
37
℃で一晩置く。振とう器のストレスを最小にするために、チューブが向
かい合わせにバランスを取っていることを確かめてほしい。
もし、回転型振とう器あるいはインキュベーターがない場合、各々の種菌の量を
10ml
の
LB
＋アンピシリン＋
IPTG
培地に増やせばよいでしょう。そして、回転子
（ス
ターラーバー）
を入れた小さな三角フラスコをマグネチックスターラーの上に置き、サ
ンプルを撹拌させながら室温で培養します。この方法だと、飽和状態に達するまで少
なくとも
24
時間培養するべきです。
実験演習のプロトコル
このアッセイを使って、各設計によって生成されるβ
-gal
の活性の量を測定します。
あなたは各株に対してアッセイを繰り返して行い、自身が測定した値にある程度確証
を得るために、クラス全体のデータを集めるとよいでしょう。
データ収集：分光光度計を使った濁度と色の測定
1.
一晩培養した培養液を
1:10
に薄めたものを
3ml
作る
（
300
μ
l
の細胞溶液を
2.7ml
の重炭酸
バッファー（
Sodium Bicarbonate Solution
）に入れる）
。
2.
もしあなたの分光光度計が、ガラスの分光光度計用試験管を使えるなら、次のス
テップへ進む。あるいは、適当なキュベットに薄めた細胞溶液を移す。このキュ
ベットの
3/4
程度入れる。
3.
この希釈液の
600nm
における吸光度
（
OD600
）
を測定する。データの表に
10
倍した
値を記録する。この値が、希釈してない細胞密度である。もし分光光度計がなく、
代わりに濁度標準液を使っている場合は、マクファーランド濁度標準液と培養液
を比較して、表
7-4 ...
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I'm always learning. So when I got on to O'Reilly, I was like a kid in a candy store. There are playlists. There are answers. There's on-demand training. It's worth its weight in gold, in terms of what it allows me to do.